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克隆形成
簡介

單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上(時(shí)間約1周以上),其后代所形成的細(xì)胞群體,稱為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50個(gè)以上的細(xì)胞,大小在0.3 - 1.0mm之間。細(xì)胞接種存活率只表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞數(shù), 但貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖并形成克隆。只有同時(shí)具有貼壁和增殖活力的細(xì)胞才會(huì)形成克隆。

克隆形成率反映細(xì)胞的獨(dú)立生存能力的強(qiáng)弱,用于評價(jià)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng); 二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)??寺⌒纬陕逝c接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測定時(shí),接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在培養(yǎng)皿中,持續(xù)一周以上,隨時(shí)檢查,到細(xì)胞形成克隆時(shí)終止培養(yǎng)。

特點(diǎn)

克隆形成實(shí)驗(yàn)可用于評價(jià)不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細(xì)胞增殖能力或群體依賴性的敏感性,評價(jià)細(xì)胞在體內(nèi)成瘤性,癌細(xì)胞不一定都可以在體內(nèi)成瘤,但若體外克隆能力越強(qiáng),即表明體內(nèi)成瘤性越強(qiáng),算是一種模擬體內(nèi)成瘤的體外實(shí)驗(yàn)。

依據(jù)采用的培養(yǎng)介質(zhì)的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。

(1)平板克隆形成:細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)基中,應(yīng)用于貼壁的細(xì)胞。

將細(xì)胞分離成單細(xì)胞懸液,在培養(yǎng)皿中接種培養(yǎng),根據(jù)集落形成數(shù)量和大小來檢測細(xì)胞增殖能力和致瘤性。適用于貼壁生長細(xì)胞和正常培養(yǎng)的細(xì)胞。


平板克隆形成.png

平板克隆形成實(shí)驗(yàn)步驟


(2)軟瓊脂克隆形成:細(xì)胞被瓊脂糖掛起來,主要應(yīng)用于懸浮的腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。

又名非錨定依賴性生長實(shí)驗(yàn),利用軟瓊脂為培養(yǎng)介質(zhì),使細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下生長。某些惡性腫瘤細(xì)胞,不僅在貼壁狀態(tài)下能增殖,在懸浮狀態(tài)下也能增殖,進(jìn)而通過軟瓊脂中形成克隆的能力反映了惡性程度,可用于細(xì)胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗(yàn)等方面。適用于非錨著依賴性生長的細(xì)胞,如骨髓造血干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞株、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。


軟瓊脂克隆形成.png

軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)步驟

服務(wù)流程
優(yōu)勢

吉滿生物具有多年的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞處理以及細(xì)胞功能檢測的相關(guān)經(jīng)驗(yàn),可以滿足不同處理需要的細(xì)胞功能檢測實(shí)驗(yàn)。

案例展示
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克隆形成
簡介

單個(gè)細(xì)胞在體外增殖6代以上(時(shí)間約1周以上),其后代所形成的細(xì)胞群體,稱為集落或克隆。每個(gè)克隆含有50個(gè)以上的細(xì)胞,大小在0.3 - 1.0mm之間。細(xì)胞接種存活率只表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞數(shù), 但貼壁后的細(xì)胞不一定每個(gè)都能增殖并形成克隆。只有同時(shí)具有貼壁和增殖活力的細(xì)胞才會(huì)形成克隆。

克隆形成率反映細(xì)胞的獨(dú)立生存能力的強(qiáng)弱,用于評價(jià)細(xì)胞群體依賴性和增殖能力。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強(qiáng); 二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強(qiáng);正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強(qiáng)。克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測定時(shí),接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在培養(yǎng)皿中,持續(xù)一周以上,隨時(shí)檢查,到細(xì)胞形成克隆時(shí)終止培養(yǎng)。

特點(diǎn)

克隆形成實(shí)驗(yàn)可用于評價(jià)不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細(xì)胞增殖能力或群體依賴性的敏感性,評價(jià)細(xì)胞在體內(nèi)成瘤性,癌細(xì)胞不一定都可以在體內(nèi)成瘤,但若體外克隆能力越強(qiáng),即表明體內(nèi)成瘤性越強(qiáng),算是一種模擬體內(nèi)成瘤的體外實(shí)驗(yàn)。

依據(jù)采用的培養(yǎng)介質(zhì)的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類。

(1)平板克隆形成:細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)基中,應(yīng)用于貼壁的細(xì)胞。

將細(xì)胞分離成單細(xì)胞懸液,在培養(yǎng)皿中接種培養(yǎng),根據(jù)集落形成數(shù)量和大小來檢測細(xì)胞增殖能力和致瘤性。適用于貼壁生長細(xì)胞和正常培養(yǎng)的細(xì)胞。


平板克隆形成.png

平板克隆形成實(shí)驗(yàn)步驟


(2)軟瓊脂克隆形成:細(xì)胞被瓊脂糖掛起來,主要應(yīng)用于懸浮的腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。

又名非錨定依賴性生長實(shí)驗(yàn),利用軟瓊脂為培養(yǎng)介質(zhì),使細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下生長。某些惡性腫瘤細(xì)胞,不僅在貼壁狀態(tài)下能增殖,在懸浮狀態(tài)下也能增殖,進(jìn)而通過軟瓊脂中形成克隆的能力反映了惡性程度,可用于細(xì)胞分化的基礎(chǔ)研究和臨床腫瘤治療的療效檢驗(yàn)等方面。適用于非錨著依賴性生長的細(xì)胞,如骨髓造血干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞株、轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。


軟瓊脂克隆形成.png

軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)步驟

服務(wù)流程
優(yōu)勢

吉滿生物具有多年的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞處理以及細(xì)胞功能檢測的相關(guān)經(jīng)驗(yàn),可以滿足不同處理需要的細(xì)胞功能檢測實(shí)驗(yàn)。

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