S蛋白是冠狀病毒最重要的表面膜蛋白,含有S1和S2兩個亞基。其中S1包含受體結(jié)合域(receptorbinding domain, RBD),負責(zé)識別細胞的受體。S2含有膜融合過程所需的基本元件。研究發(fā)現(xiàn),S蛋白介導(dǎo)受體結(jié)合和膜融合,對病毒感染宿主細胞起重要作用,此外,S蛋白上含有刺激中和抗體的主要抗原及細胞毒性淋巴細胞的重要靶標,是疫苗設(shè)計、治療性抗體和診斷方法的關(guān)鍵靶標(Walls et al., 2020; Wang et al., 2020; Zhang et al., 2020)。
為避免傳統(tǒng)的SARS-CoV-S病毒中和試驗需要操作活毒而存在的生物安全隱患,吉滿生物建立了基于假病毒系統(tǒng)的操作較安全的SARS-CoV-S中和試驗技術(shù)平臺。本產(chǎn)品以HIV慢病毒載體和SARS-CoV-S蛋白為基礎(chǔ),將SARS-CoV-S蛋白替換慢病毒包膜蛋白VSVG,與慢病毒包裝質(zhì)粒和CMV-GFP-T2A-Luciferase質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染293T細胞,包裝SARS-CoV-S假病毒,表面表達SARS-CoV-S蛋白,并且同時攜帶GFP熒光和Luciferase熒光素酶報告基因,可通過觀察熒光和檢測熒光素酶活性評價假病毒感染細胞的活性,該假病毒無自主復(fù)制能力,安全性高,可用于SARS-CoV-S受體藥物篩選、中和抗體檢測及疫苗效果評價等。