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質(zhì)粒構(gòu)建服務
簡介

質(zhì)粒(Plasmid)—— 基因工程中最常見的運載體。是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。絕大多數(shù)質(zhì)粒是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA分子。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比,質(zhì)粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基因(如抗生素抗性基因)和一個人工合成的含有多個限制性內(nèi)切酶識別位點的多克隆位點序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。

大量獲取質(zhì)??梢酝ㄟ^質(zhì)粒擴增的方式,其方法通常包括將細菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(感受態(tài))中,然后借助大腸桿菌的搖菌擴增實現(xiàn)質(zhì)粒的擴增,再通過抽提的方式收獲大量質(zhì)粒。質(zhì)粒擴增需要的源頭質(zhì)粒量非常小,1ug的質(zhì)粒已經(jīng)能夠滿足擴增的需要,這也使得質(zhì)粒的重復使用變得非常容易,因此質(zhì)粒發(fā)貨后無序列問題不退不換。

質(zhì)粒.png

質(zhì)粒DNA示意圖

特點
穩(wěn)定且可易擴增
閉合環(huán)狀雙連DNA分子,它很穩(wěn)定;攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進入受體細胞后,在細胞中進行自我復制,或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA同步復制。
可瞬轉(zhuǎn)可穩(wěn)轉(zhuǎn)
可瞬時表達發(fā)揮時間短,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株??蓪τ谝邹D(zhuǎn)染的細胞可通過轉(zhuǎn)染試劑侵染細胞,難轉(zhuǎn)染細胞可通過電轉(zhuǎn)的方法;可以瞬時表達,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株,但耗時長。
容載序列長
經(jīng)過構(gòu)建后的普通載體可容納較長的目的基因。除外源shRNA和較短cDNA片段,普通質(zhì)粒也可容納較長cDNA片段,更好的研究上調(diào)較長編碼基因或非編碼基因等后引起的細胞表型變化。
服務流程
優(yōu)勢

(1)吉滿生物具有專業(yè)的技術(shù)研究團隊和豐富的分子克隆經(jīng)驗;

(2)吉滿生物目前已有多種工具載體可選,應用于各種表達系統(tǒng);

(3)可根據(jù)客戶需求構(gòu)建不同的目的載體。

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質(zhì)粒構(gòu)建服務
簡介

質(zhì)粒(Plasmid)—— 基因工程中最常見的運載體。是附加到細胞中的非細胞的染色體或核區(qū)DNA原有的能夠自主復制的較小的DNA分子(即細胞附殖粒、又胞附殖粒)。絕大多數(shù)質(zhì)粒是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA分子。

質(zhì)粒載體是在天然質(zhì)粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構(gòu)建的質(zhì)粒。與天然質(zhì)粒相比,質(zhì)粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基因(如抗生素抗性基因)和一個人工合成的含有多個限制性內(nèi)切酶識別位點的多克隆位點序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。

大量獲取質(zhì)??梢酝ㄟ^質(zhì)粒擴增的方式,其方法通常包括將細菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌(感受態(tài))中,然后借助大腸桿菌的搖菌擴增實現(xiàn)質(zhì)粒的擴增,再通過抽提的方式收獲大量質(zhì)粒。質(zhì)粒擴增需要的源頭質(zhì)粒量非常小,1ug的質(zhì)粒已經(jīng)能夠滿足擴增的需要,這也使得質(zhì)粒的重復使用變得非常容易,因此質(zhì)粒發(fā)貨后無序列問題不退不換。

質(zhì)粒.png

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特點
穩(wěn)定且可易擴增
閉合環(huán)狀雙連DNA分子,它很穩(wěn)定;攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進入受體細胞后,在細胞中進行自我復制,或整合到染色體DNA上,隨染色體DNA同步復制。
可瞬轉(zhuǎn)可穩(wěn)轉(zhuǎn)
可瞬時表達發(fā)揮時間短,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株。可對于易轉(zhuǎn)染的細胞可通過轉(zhuǎn)染試劑侵染細胞,難轉(zhuǎn)染細胞可通過電轉(zhuǎn)的方法;可以瞬時表達,也可以構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)株,但耗時長。
容載序列長
經(jīng)過構(gòu)建后的普通載體可容納較長的目的基因。除外源shRNA和較短cDNA片段,普通質(zhì)粒也可容納較長cDNA片段,更好的研究上調(diào)較長編碼基因或非編碼基因等后引起的細胞表型變化。
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Tel: 400-627-9288
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