轉(zhuǎn)錄因子是一類參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的重要調(diào)節(jié)因子。不同轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域識(shí)別不同基因啟動(dòng)子區(qū)特定的堿基序列，行使抑制或激活該基因轉(zhuǎn)錄的功能。將目的基因啟動(dòng)子區(qū)域（通常取轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)TSS上游-2000bp）、或針對(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變、或分段截?cái)嘈蛄?，?gòu)建到報(bào)告基因載體luciferase的上游，共轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)質(zhì)粒，通過熒光素酶活反映轉(zhuǎn)錄因子對(duì)啟動(dòng)子活性的調(diào)控作用。
啟動(dòng)子是基因的一個(gè)組成部分，作為基因表達(dá)的“開關(guān)”，控制基因表達(dá)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。啟動(dòng)子本身并不控制基因活動(dòng)，而是通過與稱為轉(zhuǎn)錄因子的這種具有特殊結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)結(jié)合而控制基因活動(dòng)的。也就是說啟動(dòng)子是指能啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的序列，啟動(dòng)子對(duì)基因的表達(dá)是必須的，如果一個(gè)基因要表達(dá)，那么它的前面一定要有一段啟動(dòng)子序列，RNA聚合酶等蛋白會(huì)結(jié)合到啟動(dòng)子上才能開始基因的轉(zhuǎn)錄。但真核生物基因在無轉(zhuǎn)錄因子時(shí)處于不表達(dá)狀態(tài)，因?yàn)镽NA聚合酶自身無法啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，只有當(dāng)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到其識(shí)別的DNA序列上后，基因才開始表達(dá)。
常用載體：pGL3-Basic（左） 、pGL3-Promoter（右）
