什么是永生化？
永生化是一種細(xì)胞生物學(xué)術(shù)語。是指動(dòng)物細(xì)胞脫分化失敗，受到病毒感染，外源惡意代碼轉(zhuǎn)染，輻射或藥劑作用后，細(xì)胞分裂次數(shù)限制機(jī)制和DNA檢查-自毀機(jī)制失靈，導(dǎo)致細(xì)胞具有無限分裂生長(zhǎng)的能力的過程成為細(xì)胞永生化。
（永生化原理圖）
永生化細(xì)胞的價(jià)值
1.永生化細(xì)胞穩(wěn)定均一、性狀一致，是體外研究細(xì)胞增殖、分化、凋亡、衰老等的理想模型
2.可使傳代困難、增殖慢、易衰老的細(xì)胞獲得永生，并且永生化細(xì)胞比原代細(xì)胞更易于培養(yǎng)，因?yàn)樗鼈兩L(zhǎng)更強(qiáng)勁，可以獲得更多的細(xì)胞資源，也節(jié)省了分離細(xì)胞的周期，降低反復(fù)分離原代細(xì)胞的成本
3.永生化細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞關(guān)系密切，是研究腫瘤發(fā)生機(jī)制的重要模型
4.永生化細(xì)胞可建立穩(wěn)定細(xì)胞庫，遺傳上相同的種群，有助于提供一致且可重復(fù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
不同細(xì)胞永生化的方法也不同
HPV 可介導(dǎo)人的包皮細(xì)胞、角化上皮以及乳腺、胰導(dǎo)管和口腔等的上皮細(xì)胞永生化
猿猴病毒的SV40大T抗原 (TAg)用于黏附細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等
EBV 用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞
端粒酶TERT 用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞
永生化成功的標(biāo)志
1.細(xì)胞類型未發(fā)生轉(zhuǎn)化(通過觀察分析)
2.細(xì)胞可以持續(xù)穩(wěn)定地分裂(與原代細(xì)胞進(jìn)行同步傳代驗(yàn)證分析)
目前，較為常用是SV40大T抗原(TAg)和人端粒酶催化亞基(TERT)。此外，還有抑癌基因如p53, pRb等表達(dá)受到抑制，使得細(xì)胞老化途徑受阻。
吉滿生物依托高效的慢病毒研發(fā)平臺(tái)，可以提供多種永生化基因的慢病毒產(chǎn)品。點(diǎn)擊了解產(chǎn)品
產(chǎn)品清單
引文展示
案例一：建立Hertwig上皮根鞘原代細(xì)胞(HERS)永生化細(xì)胞系
吉滿助力
使用pGMLV-SV40T-PURO(Genomeditech Co., Ltd.)轉(zhuǎn)染原代分離的1代HERS細(xì)胞，采用有限稀釋方法篩選并鑒定得到可培養(yǎng)超過50代以上的單克隆細(xì)胞HERS-H1和HERS-C2。通過CCK-8法、免疫熒光染色和real-time PCR檢測(cè)了HERS-H1和HERS-C2細(xì)胞的增殖、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化能力和上皮-間充質(zhì)相互作用等特征。HERS-C2細(xì)胞具有EMT特征，在體外可分化為牙骨質(zhì)形成細(xì)胞，在體內(nèi)可生成牙骨質(zhì)樣組織。HERS-H1能誘導(dǎo)DPCs在體外向成牙本質(zhì)細(xì)胞分化，在體內(nèi)生成牙本質(zhì)樣組織。
來源于Stem Cell Res.Ther.(IF:7.5;Q1).2019 Jan 3;10(1):3.DOI:10.1186/s13287-018-1106-8
案例二：建立肺泡巨噬細(xì)胞（AMs）永生化細(xì)胞系
吉滿助力
作者從RGS1fl/fl；Flt3-creERt2 YFP 和 RGS1 fl/fl ；Tie2-creERt2 YFP小鼠分離獲得的Flt3+ AMs和Tie2+ AMs細(xì)胞(圖B) 經(jīng)pGMLV-SV40T lentivirus(Genomeditech Co., Ltd.) 慢病毒感染獲得穩(wěn)定傳代的AMs永生化細(xì)胞系，加tamoxifen誘導(dǎo)后，流式檢測(cè)RGS1和YFP的表達(dá)變化(圖C)。
來源于Cell Death Differ(IF:12.4;Q1).2021 Jul;28(7):2238-2256.DOI:10.1038/s41418-021-00750-x.
