技術(shù)干貨
小動物活體成像技術(shù),是在1999年美國哈佛大學(xué)Weisslede提出的一項技術(shù),該技術(shù)是指應(yīng)用影像學(xué)方法, 對活體狀態(tài)下的生物過程進(jìn)行組織、細(xì)胞和分子水平的定性和定量研究。
細(xì)胞在組織間的穿梭、分子間的相互作用、神經(jīng)信號的實時傳遞……這些曾經(jīng)隱藏在“黑箱”中的生命奧秘,如今在活體成像技術(shù)下宛如一部部活生生的微觀“電影”,能實時、動態(tài)、在原位觀察生命如何在生物體內(nèi)運(yùn)作!
光學(xué)成像技術(shù)
生物發(fā)光成像(Bioluminescence Imaging)
原理:利用熒光素酶(Luciferase)基因標(biāo)記目標(biāo)細(xì)胞或基因,注射底物(如D-熒光素鈉/鉀鹽)后,在氧和ATP存在下催化發(fā)光反應(yīng),光波長在540-600 nm,發(fā)光的強(qiáng)度與標(biāo)記細(xì)胞的數(shù)目呈線性關(guān)系,可以分析動物體內(nèi)特定的基因表達(dá)、細(xì)胞發(fā)育和相關(guān)生物學(xué)進(jìn)程。
熒光成像(Fluorescence Imaging)
原理:通過熒光蛋白(如GFP、mCherry)或染料標(biāo)記目標(biāo),經(jīng)特定波長激發(fā)后發(fā)射熒光成像。
兩大成像系統(tǒng)對比
為什么需要慢病毒?
傳統(tǒng)成像難以長期動態(tài)示蹤細(xì)胞遷移、基因表達(dá)等生物過程,而慢病毒載體可通過基因編輯,讓細(xì)胞自帶“發(fā)光標(biāo)簽”,實現(xiàn)活體實時追蹤。
吉滿生物活體成像慢病毒現(xiàn)貨清單
吉滿服務(wù)
1.慢病毒載體設(shè)計
2.三標(biāo)系統(tǒng)
熒光素酶(Luciferase):注射底物D-熒光素鉀鹽后發(fā)光,適用于深組織成像
熒光蛋白(如GFP):直接激發(fā)熒光,定位精確
抗性基因(如Puromycin):篩選穩(wěn)定表達(dá)株
3.啟動子優(yōu)化
通用型:CMV啟動子(強(qiáng)表達(dá),但無組織特異性)
靶向型:端粒酶hTERT啟動子(僅在腫瘤細(xì)胞激活,避免脫靶)
應(yīng)用場景
腫瘤研究
1)腫瘤生長與轉(zhuǎn)移示蹤
將攜帶Luciferase和熒光蛋白基因的慢病毒感染腫瘤細(xì)胞(如胰腺癌、肝癌、乳腺癌細(xì)胞),構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系后接種至小鼠體內(nèi),通過生物發(fā)光成像實時監(jiān)測原位瘤生長、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移(如肺轉(zhuǎn)移、骨轉(zhuǎn)移)及轉(zhuǎn)移路徑。
2)腫瘤特異性靶向成像
采用腫瘤特異性啟動子(如端粒酶hTERT啟動子)驅(qū)動報告基因表達(dá),僅在端粒酶陽性的腫瘤細(xì)胞中激活熒光信號,實現(xiàn)高特異性成像,避免正常組織背景干擾。
3)腫瘤機(jī)制研究
結(jié)合基因編輯技術(shù)(如過表達(dá)/干擾特定基因),慢病毒雙標(biāo)記(Luciferase+目的基因)可同步觀察基因功能與腫瘤表型變化。
干細(xì)胞治療與再生醫(yī)學(xué)
1)干細(xì)胞體內(nèi)分布與存活監(jiān)測
慢病毒轉(zhuǎn)染干細(xì)胞(如臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞)后表達(dá)Luciferase,注入動物模型皮下或靜脈,通過活體成像追蹤干細(xì)胞遷移、歸巢及長期存活狀態(tài),評估治療有效性。
2)干細(xì)胞治療機(jī)制探索
在強(qiáng)直性脊柱炎等疾病模型中,標(biāo)記的間充質(zhì)干細(xì)胞可用于研究炎癥微環(huán)境中的定向遷移機(jī)制。
藥物研發(fā)與療效評估
1)藥效動力學(xué)研究
在移植瘤模型中,通過慢病毒標(biāo)記的腫瘤細(xì)胞實時監(jiān)測藥物干預(yù)后腫瘤體積變化、轉(zhuǎn)移抑制效果及復(fù)發(fā)情況。
2)藥物靶向遞送驗證
結(jié)合報告基因與藥物載體(如納米顆粒),活體成像可直觀顯示藥物在腫瘤部位的富集程度及代謝動力學(xué)。
從“看見”單根神經(jīng)的超級CT,到讓細(xì)胞發(fā)光的基因探針,活體成像技術(shù)正撕開生命暗箱!慢病毒載體的精準(zhǔn)投遞,賦予成像以時間維度與分子特異性。
吉滿生物可以提供活體成像慢病毒相關(guān)現(xiàn)貨產(chǎn)品和一站式定制服務(wù),根據(jù)您的需求,為你設(shè)計滿意的實驗方案。