產(chǎn)品使用技巧
試劑 Genoagent
GMTrans脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑， 適用于DNA、RNA和寡核苷酸的轉(zhuǎn)染，對大多數(shù)真核細胞具有很高的轉(zhuǎn)染效率。其獨特的配方使其可直接加入培養(yǎng)基中，血清的存在不會影響轉(zhuǎn)染效率，這樣可以減少了去除血清對細胞的損傷。轉(zhuǎn)染后不需要除去核酸-GMTrans復(fù)合物或更換新鮮培養(yǎng)基，也可在4 ～6小時后除去。
特點：高效性、低毒性、操作方便且多樣性
轉(zhuǎn)染tips
一、GMTrans 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑要求細胞鋪板密度較高，以 60%-80%為佳，這有助于減少陽離子脂質(zhì)體細胞毒性造成的影響，具體鋪板密度需要預(yù)實驗摸索
*如果你研究的基因要求比較長的表達時間，比如細胞周期相關(guān)基因或細胞表面蛋白，最好選擇細胞鋪板密度要求較低的轉(zhuǎn)染試劑，不適合用脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑。 二、GMTrans 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑可用于有血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)染，并且轉(zhuǎn)染前后不需要換培養(yǎng)基。但制備轉(zhuǎn)染復(fù)合物時要求用無血清培養(yǎng)基稀釋 DNA 和轉(zhuǎn)染試劑，因為血清會影響復(fù)合物的形成。另外，要檢測所用的無血清培養(yǎng)基與脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑的相容性，已知 CD293，SFMII，VP-SFM 就不相容。 三、轉(zhuǎn)染的時候培養(yǎng)基中不能添加抗生素 四、使用高純度的 DNA 或 RNA 有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，質(zhì)粒中的內(nèi)毒素是轉(zhuǎn)染的大敵 五、陽離子脂質(zhì)體應(yīng)該在 4℃保存，要注意避免反復(fù)長時間開蓋，可能會導(dǎo)致脂質(zhì)體氧化而影響轉(zhuǎn)染效率 六、初次使用應(yīng)優(yōu)化 DNA 濃度和陽離子脂質(zhì)體試劑量以得到最大的轉(zhuǎn)染效率。DNA 和轉(zhuǎn)染試劑的比例，通常推薦是1:2-1:3，比如 24 孔板內(nèi)接種 0.5-2×105個細胞，使用 0.5 μg DNA 和 1-1.5 μL 轉(zhuǎn)染試劑。通過調(diào)整 DNA/GMTrans 脂質(zhì)體核酸轉(zhuǎn)染試劑比例優(yōu)化轉(zhuǎn)染效率，保證細胞密度大于90%，DNA(μg): GMTrans(μL)比值在 1:0.5-1:5 數(shù)據(jù)展示
文獻引用
| Geng X, Tang Y, Gu C, et al. Integrin αVβ3 antagonist-c (RGDyk) peptide attenuates the progression of ossification of the posterior longitudinal ligament by inhibiting osteogenesis and angiogenesis[J]. Molecular Medicine, 2024, 30(1): 57. |
| Xiao C, Liu J, Cheng Y, et al. RUNX1 targeting AKT3 promotes alveolar hypercoagulation and fibrinolytic inhibition in LPS induced ARDS[J]. Respiratory Research, 2024, 25(1): 54. |
| Han B, Lv Y, Moser D, et al. ACE2-independent SARS-CoV-2 virus entry through cell surface GRP78 on monocytes–evidence from a translational clinical and experimental approach[J]. EBioMedicine, 2023, 98. |
| Gong H Y, Zhou P C, Zhang H Y, et al. Transcriptional regulation of Glis2 in hepatic fibrosis[J]. Experimental & Molecular Medicine, 2023, 55(7): 1462-1478. |
| Feng W, Jin Q, Ming-Yu Y, et al. MiR-6924-5p-rich exosomes derived from genetically modified Scleraxis-overexpressing PDGFRα (+) BMMSCs as novel nanotherapeutics for treating osteolysis during tendon-bone healing and improving healing strength[J]. Biomaterials, 2021, 279: 121242. |
| Wang P, Gao R, Wu T, et al. Accumulation of endogenous adenosine improves cardiomyocyte metabolism via epigenetic reprogramming in an ischemia-reperfusion model[J]. Redox Biology, 2023, 67: 102884. |
| Wang X, Guo L, Huang J, et al. Plasminogen activator inhibitor-1 potentiates neutrophil infiltration and tissue injury in colitis[J]. International journal of biological sciences, 2023, 19(7): 2132. |
