背景介紹
慢病毒(Lentivirus)是逆轉(zhuǎn)錄病毒科下的一個(gè)屬，其基因結(jié)構(gòu)和其他逆轉(zhuǎn)錄病毒類似。包含RNA和蛋白，遺傳信息儲(chǔ)存在RNA中，衣殼糖蛋白與細(xì)胞膜上特異受體結(jié)合而進(jìn)入易感靶細(xì)胞。其RNA進(jìn)入靶細(xì)胞，經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄，整合到基因組，從而高水平的表達(dá)效應(yīng)分子。點(diǎn)擊了解產(chǎn)品
慢病毒載體基因遞送和表達(dá)的特點(diǎn)
一、感染譜廣
可有效感染腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)元、心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型細(xì)胞
二、穩(wěn)定表達(dá)
通過(guò)將外源基因整合到宿主細(xì)胞基因組上，可實(shí)現(xiàn)目的基因長(zhǎng)期穩(wěn)定表達(dá)，不隨細(xì)胞分裂傳代而丟失
三、安全性高
未發(fā)現(xiàn)致病性，已被用于CAR-T治療作用于人體
四、免疫原性低
體內(nèi)注射不會(huì)引起明顯的免疫反應(yīng)，適用于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
五、包裝容量有限
插入的外源基因序列需在4kb以下
六、包裝滴度較低
相比腺病毒與腺相關(guān)病毒，慢病毒包裝滴度稍低
慢病毒包裝
示意圖（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)）
慢病毒包裝流程
慢病毒包裝/濃縮試劑盒
部分客戶引文
| Duan Y, Li Q, Wu J, et al. A detrimental role of endothelial S1PR2 in cardiac ischemia-reperfusion injury via modulating mitochondrial dysfunction, NLRP3 inflammasome activation, and pyroptosis[J]. Redox Biology, 2024: 103244. |
| Lin P, Chen W, Long Z, et al. RBBP6 maintains glioblastoma stem cells through CPSF3-dependent alternative polyadenylation[J]. Cell Discovery, 2024, 10(1): 32. |
| Shan L, Liao X, Yang X, et al. Naked cuticle homolog 2 controls the differentiation of osteoblasts and osteoclasts and ameliorates bone loss in ovariectomized mice[J]. Genes & Diseases, 2024: 101209. |
| Liu L, Liu Z, Liu Q, et al. LncRNA INHEG promotes glioma stem cell maintenance and tumorigenicity through regulating rRNA 2’-O-methylation[J]. Nature Communications, 2023, 14(1): 7526. |
| Zhang X, Guo H, Chen J, et al. Highly proliferative and hypodifferentiated CAR-T cells targeting B7–H3 enhance antitumor activity against ovarian and triple-negative breast cancers[J]. Cancer Letters, 2023, 572: 216355. |
| Zhang C, Li Q, Xu Q, et al. Pulmonary interleukin 1 beta/serum amyloid A3 axis promotes lung metastasis of hepatocellular carcinoma by facilitating the pre-metastatic niche formation[J]. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2023, 42(1): 166. |
常見(jiàn)問(wèn)題解答
| Q | 慢病毒顆粒濃縮后沒(méi)看到白色沉淀，怎么回事？ |
| A | 如果看不到明顯的白色沉淀，就在沉淀可能形成的區(qū)域用移液器小心吹打；白色沉淀的多少并不代表病毒量的多少。白色沉淀中除病毒顆粒外，還有血清蛋白和少量的細(xì)胞碎片和 基因組 DNA 等。二者在使用效果上無(wú)明顯差異，均溶于水，但熒光素鈉鹽溶解度(100mg/mL)要高于熒光素鉀鹽(60mg/mL)。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究中，研究者更傾向于選擇熒光素鉀鹽。 |
| Q | 按照慢病毒包裝試劑盒操作進(jìn)行到收集病毒上清液這一步，該如何保存？ |
| A | 如果3天內(nèi)進(jìn)行濃縮，可以將慢病毒懸液存儲(chǔ)在4°C。通常不建議超過(guò)3天，因?yàn)椴《镜幕钚钥赡軙?huì)逐漸降低；長(zhǎng)期儲(chǔ)存的話，建議將慢病毒懸液分裝到無(wú)菌的冷凍管中，并存儲(chǔ)在-80°C的超低溫冰箱中。 |
| Q | 病毒上清液與濃縮液混合后，孵育時(shí)間長(zhǎng)短有影響嗎？ |
| A | 4℃放置的時(shí)間越長(zhǎng)（如放置過(guò)夜），病毒的得率可能會(huì)更高；一般 4℃條件下病毒顆粒可以在濃縮液里穩(wěn)定保存幾天。 |
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